LIMPIEZA Y RECOGIDA DEL PUESTO DE TRABAJO Y DE EL LABORATORIO

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CROMATROGRAFIA EN COLUMNA

Guión experimental

1. Preparar una suspensión de alúmina en etanol (25 g alúmina en etanol) y adicionarlo a la columna cromatográfica. Obtener una altura de columna de 8 a 10 cm de fase estacionaria, evitando que el nivel del etanol descienda por debajo de la alúmina. El etanol debe quedar 1 mm por encima de la capa de absorbente. 
   
   
   
   
   
   
   
2. Preparar una solución mixta de los colorantes pesando 5 mg de azul de metileno y otros 5 mg de naranja de metileno, pasándolos  a un tubo de ensayo y disolviendo unos 5 mL de alcohol.
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
3. Adicionar 2 mL de la muestra problema a la columna sin remover la fase estacionaria.
4. Dejar gotear hasta que el nivel de la muestra llegue al absorbente. 
   
5. Adicionar pequeñas cantidades de etanol para separar el primer componente hasta eluirlo.
   
6. Cuando el primer colorante salga por la parte inferior de la columna, recoger fracciones de 2 mL en tubos de ensayo.
   
7. Para eluir el segundo componente añadir pequeños volúmenes de agua destilada. 
   
8. Repetir la práctica eluyendo en primer lugar con agua.

Resultados

CROMATOGRAFIA

Guión experimental

1ª parte

1. La cromatografía en papel se aplicará a las mismas tintas de rotulador en tres experiencias con disolventes distintos:  agua, alcohol y acetona. 
2. Preparar la cubeta con la fase móvil con una altura de 1,5 cm de se base.
   
   
   
3. Cortar tiras de papel de 18 cm de largo y 4 de ancho.
   
4. Sumergir el papel con las marcas en los disolventes sin que toque la línea.
   
   
   
   
   
   
   
5. Dejar que se desarrolle.
6. Sacar la tira antes que el disolvente llegue a la parte superior.
   
   
   
   

2ª parte

1. En un mortero, machacar una hoja de espinaca con una mezcla de 4 ml de hexano y 2 ml de etanol.
   
2. Con una pipeta Pasteur transferir el extracto a un tubo de ensayo y agitar con mucha suavidad con una cantidad igual de agua, evitando la formación de emulsiones. Eliminar la fase acuosa con ayuda de una pipeta Pasteur, y el lavar sucesivamente dos veces con 2 ml de agua para eliminar el etanol. Transferir la fase orgánica a un tubo de ensayo y añadir con una espátula sulfato sódico anhidro para eliminar el agua.
   
   
   
   
3. Preparación de la placa de cromatografía: Marcar la placa, con ayuda de un lápiz los puntos en donde se va depositar la muestra (tres puntos). Con un capilar, tomar un poco de la disolución orgánica conteniendo los pigmentos y pinchar la placa de cromatografía en los tres puntos con concentraciones diferentes. Para evitar que la mezcla difunda por la placa, vaciar el contenido del capilar poco a poco sobre el punto, y soplar suavemente cada vez, para secar el disolvente.
   
   
   
   
   
   
   

Conclusión científica

Podemos deducir con los resultados que para realizar las cromatografías de los rotuladores el mejor disolvente es el agua mientras que para la clorofila es el alcohol.